潔凈室潔凈度與微生物測量檢測方法
食品藥品包裝材料車間、無菌醫療器械車間、醫院潔凈手術室、生物安全實驗室、保健食品GMP車間、化妝品/消品車間、動物實驗室、獸藥GMP車間等潔凈室、潔凈廠房建設好后一般都需要第三方檢測、調試等。
潔凈室、潔凈區的潔凈度主要是靠送入足夠量的潔凈空氣,以排替、稀釋室內產生的顆粒污染物來實現的。為此,測定潔凈室或潔凈設施的送風量、平均風速、送風均勻性、氣流流向及流型等項目十分必要。
單向流主要是依靠潔凈氣流推擠、排替室內、區內的污染空氣以維持室內、區內的潔凈度。因此,其送風斷面風速及均勻性是影響潔凈度的重要參數。較高的、較均勻的斷面風速能更快、更有效地排除室內工藝過程產生的污染物,因此它們是主要關注的檢測項目。
非單向流主要是靠送入的潔凈空氣來沖淡與稀釋室內、區內的污染物以維持其潔凈度。因此,換氣次數越大,氣流流型合理,稀釋效果越顯著,潔凈度也相應提高。所以非單相流潔凈室、潔凈區的送風量及相應的換氣次數,是主要關注的氣流測試項目。為了獲得可重復的讀數,記錄各測點風速的時間平均值。
1.潔凈度的測定:
?、?在施工驗收規范JGJ71中規定如下:
a. 最低采樣點數見下表,每個測點最少采樣機3次。
表十七 最低采樣點數表
面積(m2) | 潔 凈 度 | |||
100級和高于100級 | 1000級 | 10000級 | 100000級 | |
小于10 | 2~ 3 | 2 | 2 | 2 |
10 | 4 | 3 | 2 | 2 |
20 | 8 | 6 | 2 | 2 |
40 | 16 | 13 | 4 | 2 |
100 | 40 | 32 | 10 | 3 |
200 | 80 | 63 | 20 | 6 |
400 | 160 | 126 | 40 | 13 |
1000 | 400 | 316 | 100 | 32 |
2000 | 800 | 633 | 200 | 63 |
b. 測定潔凈度的最小采樣量按下表:
表十八 最小采樣量表(L)
潔凈度級別(級) | 粒 徑(mm) | ||||
0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.5 | 5.0 | |
1 | 17 | 85 | 198 | 566 | |
10 | 2.83 | 8.5 | 19.8 | 56.6 | |
100 | 2.83 | 2.83 | 5.66 | ||
1000 | 2.83 | 85 | |||
10000 | 2.83 | 8.5 | |||
100000 | 2.83 | 2.83 |
c. 對于單向流潔凈室采樣口應朝著氣流方向。對于非單向流潔凈室采樣口宜朝上。采樣速度盡可能接近室內氣流速度。即(等速采樣)。
測點的布置原則:每層不少于5個測點,多于5點時可分層布置。測點布置在距地0.8m高的對 角線上。
?、?潔凈度測定結果的判定:
a. 如實測狀態(空態,靜態,動態)與事先約定的狀態相同,以其潔凈度級別上限作為評定標準。
b. 如實測狀態為空態或靜態,則動態時的粒子數肯定會高,有時可用空態粒子數的5~10倍來估算動態時的塵埃粒子數。
2.微生物粒子的測定:
?、?采樣點的布置和要求:
a. 浮游菌測定時,其采樣點位置可以與懸浮粒子測定點的布置相同。測點距離地面0.8~1.5m,送風口測點位置距送風面30cm左右。根據需要可在關鍵部位增加測點。測點布置要均勻。見下表:
表十九 浮游菌測定最少采樣點數表
面積(m2) | 潔 凈 度 | |||||
100級 | 10000級 | 100000級 | ||||
驗證 | 監測 | 驗證 | 監測 | 驗證 | 監測 | |
小于10 | 2~ 3 | 1 | 2 | 1 | 2 | - |
10~20 | 4 | 2 | 2 | 1 | 2 | - |
20~40 | 8 | 3 | 2 | 1 | 2 | - |
40~100 | 16 | 4 | 4 | 1 | 2 | - |
100~200 | 40 | 10 | 3 | - | ||
200~400 | 80 | 20 | 6 | - | ||
400 | 160 | 40 | 13 | - |
b.沉降菌測定時,其采樣點位置可以與懸浮粒子測定點的布置相同。測點距離地面0.8~1.5m。根據需要可在關鍵部位增加測點。測點布置要均勻。對于沉降菌法不僅僅滿足于最少采樣總數,還需滿足最少采樣培養皿總數。見下表:
沉降菌測定最少采樣點數表
面積(m2) | 潔 凈 度 | ||
100級 | 10000級 | 100000級 | |
小于10 | 2~ 3 | 2 | 2 |
10~20 | 4 | 2 | 2 |
20~40 | 8 | 2 | 2 |
40~100 | 16 | 4 | 2 |
100~200 | 40 | 10 | 3 |
200~400 | 80 | 20 | 6 |
400~1000 | 160 | 40 | 13 |
1000~2000 | 400 | 100 | 32 |
2000以上 | 800 | 200 | 63 |
沉降菌測定最少培養皿數表
潔凈度等級(級) | 90培養皿數(以沉降0.5h計) |
高于100 | 44 |
100 | 14 |
1000 | 5 |
10000 | 2 |
100000 | 2 |
浮游菌測定法最小采樣量應按不同潔凈度等級來確定。見下表
浮游菌測定法最小采樣量表
潔凈度等級(級) | 采樣量/L?次 | |
日常監測 | 環境驗證 | |
100 | 600 | 1000 |
10000 | 400 | 500 |
100000 | 50 | 100 |
?、?微生物粒子測定方法:
a. 浮游菌的測定法
首先,要對測定儀器,培養皿,采樣器等進行消毒滅菌,采樣口和采樣管在使用前必須用高溫滅菌。
第二,采樣者應穿與潔凈室等級相應的潔凈服,放入或調換培養皿前,雙手要用消毒劑消毒。
第三,儀器消毒后放入培養皿前,先開動真空泵抽氣,使儀器中的殘存消毒劑蒸發,時間不小于5min。
第四,關閉真空泵,放入培養皿,蓋好蓋子后調節采樣器。
第五,置采樣口于采樣點,依次開啟采樣器,真空泵,轉動定時器并根據采樣量選定采樣時間。
第六,采樣結束后,將培養皿置于30~50oC恒溫培養箱中,時間不小于48小時。
第七,用肉眼計數,然后用5~10倍的放大鏡檢查,是否有遺漏。
b. 沉降菌的測定法
首先,要對測定儀器,培養皿等進行嚴格的消毒滅菌,在37oC恒溫培養箱中,進行不小于48小時的培養和觀察,確認無菌后方可使用。
第二,一般采用90mm的沉降平皿,注入20mL培養基,放在測點處,開蓋暴露30min,將培養皿蓋蓋上倒置,然后在30~35oC恒溫培養箱中,進行不小于48小時的培養并用肉眼計菌落數,并記錄生成的菌落數,然后用5~10倍的放大鏡檢查,是否有遺漏。